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      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒

      簡(jiǎn)要描述:CYTO-ID® Autophagy Detection Kit 使用新型染料檢測(cè)自噬小泡和監(jiān)控活細(xì)胞自噬流,選擇性標(biāo)記積累的自噬小泡。染料已通過(guò)優(yōu)化,不染溶酶體,在自噬前體、自噬體和自噬溶酶體里呈現(xiàn)出明亮的熒光。該試劑盒提供了一種無(wú)需細(xì)胞轉(zhuǎn)染,可以在活細(xì)胞中監(jiān)控細(xì)胞自噬的快速定量方法。

      基礎(chǔ)信息

      產(chǎn)品型號(hào)

      廠(chǎng)商性質(zhì)

      生產(chǎn)廠(chǎng)家

      更新時(shí)間

      2025-11-09

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      詳細(xì)介紹
      品牌其他品牌供貨周期一個(gè)月

      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒





        CYTO-ID® Autophagy Detection Kit 使用新型染料檢測(cè)自噬小泡和監(jiān)控活細(xì)胞自噬流,選擇性標(biāo)記積累的自噬小泡。染料已通過(guò)優(yōu)化,不染溶酶體,在自噬前體、自噬體和自噬溶酶體里呈現(xiàn)出明亮的熒光。該試劑盒提供了一種無(wú)需細(xì)胞轉(zhuǎn)染,可以在活細(xì)胞中監(jiān)控細(xì)胞自噬的快速定量方法。

      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒

      CYTO-ID® Autophagy Detection Kit

      ◆特點(diǎn)


      ● 無(wú)需轉(zhuǎn)染,定量監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的自噬情況

      ● 免去 LC3-GFP 轉(zhuǎn)染所需的時(shí)間和精力以及轉(zhuǎn)染效率的驗(yàn)證

      ● 含有特殊基團(tuán)的染料選擇性地染色自噬小泡

      ● 試劑盒中包含已知活性的自噬抑制劑與激活劑

      ● 快速量化原生異質(zhì)性細(xì)胞群中的自噬

      ● 選擇性地染色,可檢測(cè)和區(qū)分自噬流(autophagic flux)和自噬溶酶體的積累

      ● 不染溶酶體,減少其他染料的背景干擾

       便于高通量篩選自噬激活劑和抑制劑


      ◆原理


        該產(chǎn)品所用探針是陽(yáng)離子兩親性示蹤劑(CAT)染料,以類(lèi)似誘導(dǎo)磷脂藥物的方式迅速進(jìn)入到細(xì)胞中。染料的功能基團(tuán)能夠選擇性標(biāo)記與自噬通路相關(guān)的小泡,而不會(huì)在溶酶體中聚集。


      胞內(nèi)物質(zhì)被擴(kuò)大的膜囊包裹,吞噬泡形成雙層膜囊泡,成為自噬體。自噬體外膜隨后與溶酶體融合,和內(nèi)部物質(zhì)被自噬性溶酶體降解。自噬的各種調(diào)節(jié)因子也被描繪于圖中。

      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒

      自噬原理圖



      ◆應(yīng)用


      省時(shí)省力,無(wú)需轉(zhuǎn)染即可自快速全面的標(biāo)記自噬小泡


      為了演示 CYTO-ID® Green detection reagent 的優(yōu)勢(shì),先用 RFP-LC3 表達(dá)載體轉(zhuǎn)染 HeLa 細(xì)胞,10 μM 的 Tamoxifen 處理過(guò)夜,然后用 CYTO-ID® 綠色檢測(cè)試劑染色。LC3 轉(zhuǎn)染法需要過(guò)夜,而 CYTO-ID® 綠色檢測(cè)試劑的方法在15-30分鐘內(nèi)標(biāo)記細(xì)胞達(dá)100%。圖A:綠信號(hào)顯示自噬小泡的 CYTO-ID® 綠染;圖B:成功轉(zhuǎn)染細(xì)胞的 RFP-LC3 表達(dá)(紅色);圖C:自噬體的特異性標(biāo)記 LC3,與 CYTO-ID® 綠色染料標(biāo)記的小泡共定位的復(fù)合圖像。

      的發(fā)放

      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒




      無(wú)轉(zhuǎn)染的自噬檢測(cè)


      Hela細(xì)胞進(jìn)行饑餓與恢復(fù),然后使用 CYTO-ID® Green detection reagent 標(biāo)記。染料可以明確檢測(cè)和量化自噬及與自噬誘導(dǎo)相關(guān)的自噬小泡前體。圖1A:穩(wěn)定表達(dá) GFP-LC3 的CHO細(xì)胞,結(jié)果顯示對(duì)照組與饑餓的細(xì)胞群的相對(duì)較差的基線(xiàn)分離,自噬難以量化。圖1B:CYTO-ID® Autophagy Detection Kit 特異性標(biāo)記 LC3 蛋白依賴(lài)的自噬小泡,免去轉(zhuǎn)染操作。



      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒



      自噬積累和自噬流的可視化


      可用熒光顯微鏡觀(guān)察CYTO-ID® 自噬綠色染料檢測(cè)的自噬液泡積累和自噬流。Hela細(xì)胞用以下試劑進(jìn)行模擬誘導(dǎo),0.2% DMSO(A)和100 μM  Clonidine hydrochloride(B)進(jìn)行誘導(dǎo),5 μM Loperamide hydrochloride 和 1 μM PP242 hydrate(D)在37°C誘導(dǎo)12小時(shí)。處理后,細(xì)胞在37℃下用CYTO-ID® Green Detection reagent 孵育10分鐘,再用分析緩沖液清洗。細(xì)胞核被 Hoechst 33342 染料復(fù)染為藍(lán)色。



      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒


      避免非特異性溶酶體染色的背景干擾


      相比其他 MDC 染色溶酶體檢測(cè),CYTO-ID® 綠色染料無(wú)溶酶體染色背景,CYTO-ID® Autophagy kit 無(wú)需紫外活細(xì)胞分析,在顯微鏡共標(biāo)記應(yīng)用中,與 Hoechst 染料兼容。



      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒


      使用流式細(xì)胞儀通過(guò) CYTO-ID® Autophagy Detection 

      Kit 分析自噬


      對(duì)照組(紅線(xiàn)峰值)無(wú)誘導(dǎo),10 uM Tamoxifen(ALX-550-095)處理 Jurkat 細(xì)胞(白血病T細(xì)胞)(藍(lán)線(xiàn)峰值)。處理18小時(shí)后,細(xì)胞結(jié)合 CYTO-ID® 綠色檢測(cè)試劑,然后不經(jīng)過(guò)流式細(xì)胞儀清洗,進(jìn)行分析。結(jié)果通過(guò)直方圖呈現(xiàn)。對(duì)照組細(xì)胞被染色,但熒光亮度低。實(shí)驗(yàn)組中,CYTO-ID® 綠色熒光信號(hào)增加約2倍,表明 Tamoxifen 處理能引起 Jurkat 細(xì)胞中自噬的增加。




      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒

      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒

      使用 mTOR 激酶抑制劑 Rapamycin 處理 HepG2 細(xì)胞孵育過(guò)夜,結(jié)果顯示 CYTO-ID® 染色信號(hào)升高。


      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒


      CYTO-ID® 綠色染料大多與 RFP-LC3蛋白共定位。0.1 μM Rapamycin(典型自噬誘導(dǎo)劑)處理過(guò)夜,轉(zhuǎn)染 Hela 細(xì)胞表達(dá)RFP-LC3。

      A: CYTO-ID® Green 染色; B: RFP-LC3; C: 合成圖像。



      CYTO-ID® 自噬檢測(cè)試劑盒 2.0



      ◆相關(guān)產(chǎn)品


      產(chǎn)品編號(hào)

      產(chǎn)品名稱(chēng)

      規(guī)格

      備注

      應(yīng)用

      ENZ-51002-25

      GFP-Certified® Apoptosis/Necrosis detection kit

      細(xì)胞凋亡/壞死檢測(cè)試劑盒

      25 assays

      多重檢測(cè),區(qū)分正常、早期凋亡、晚期凋亡和壞死細(xì)胞,與GFP和其他綠色熒光探針兼容。

      FC,熒光顯微鏡,熒光檢測(cè)

      ENZ-51002-100

      100 assays

      ENZ-51021-K200

      Nuclear-ID® Green

      hromatin condensation detection kit

      細(xì)胞核綠色染色體皺縮檢測(cè)試劑盒

       

      1 Kit

      高滲透性的綠色熒光染色增強(qiáng)了細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)染色質(zhì)固縮。 

      FC,熒光顯微鏡,熒光檢測(cè)

      ENZ-52406

      NUCLEAR-ID® Red DNA stain

      DNA染色試劑盒(紅色熒光)

      200 µL

      細(xì)胞可滲透的DNA染色應(yīng)用廣泛。

      ≥93%(HPLC),F(xiàn)C,熒光檢測(cè)

      ENZ-CHM103-0200

      Nuclear-ID® Blue 

      DNA stain   (GFP-Certified® )

      Nuclear ID® 藍(lán)色DNA染色(GFP細(xì)胞系)

      200 µL

      細(xì)胞可滲透的DNA染色應(yīng)用廣泛。

      ≥93%(HPLC),F(xiàn)C,熒光檢測(cè)

      ENZ-51015-KP002

      Lyso-ID® Red

      cytotoxicity kit   (GFP-Certified® )

      溶酶體細(xì)胞毒理檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)

      (綠色細(xì)胞系)

      1 Kit

      快速,定量和HTS-兼容的檢測(cè)活細(xì)胞毒性試劑。

      熒光顯微鏡,熒光檢測(cè)

      ENZ-51035-0025

      PROTEOSTAT® Aggresome   etection kit

      蛋白內(nèi)穩(wěn)態(tài)聚集體 檢測(cè) 試劑盒

      25 tests

      Robust、定量的聚集小體用于神經(jīng)退行性疾病,肝病和毒理學(xué)研究

      FC,熒光顯微鏡,熒光檢測(cè)

      ENZ-51035-K100

      100 tests

       


      產(chǎn)品列表
      產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)產(chǎn)品規(guī)格產(chǎn)品等級(jí)備注
      ENZ-51031-K200Cyto-ID® Autophagy detection kit CYTO-ID®自噬檢測(cè)試劑盒200 tests--
      ENZ-51031-0050Cyto-ID® Autophagy detection kit CYTO-ID®自噬檢測(cè)試劑盒50 tests--


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